目的基因转入表达载体中,目的基因后面多余的序列会影响表达吗
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/19 12:12:40
![目的基因转入表达载体中,目的基因后面多余的序列会影响表达吗](/uploads/image/f/6448978-10-8.jpg?t=%E7%9B%AE%E7%9A%84%E5%9F%BA%E5%9B%A0%E8%BD%AC%E5%85%A5%E8%A1%A8%E8%BE%BE%E8%BD%BD%E4%BD%93%E4%B8%AD%2C%E7%9B%AE%E7%9A%84%E5%9F%BA%E5%9B%A0%E5%90%8E%E9%9D%A2%E5%A4%9A%E4%BD%99%E7%9A%84%E5%BA%8F%E5%88%97%E4%BC%9A%E5%BD%B1%E5%93%8D%E8%A1%A8%E8%BE%BE%E5%90%97)
因为基因的插入和切断是有特殊位点的不是随意的插入和切断,而且别把DNA想得太短,很长的,没有表达意义的序列非常多,真核生物基因转录下的MRNA,也有无用序列需要剪切组合才可用.质粒上的基因可能会影响,
要构建重组载体的目的就是把目的基因连到载体上,所以最有效的重组DNA是目的基因-载体.目的基因-目的基因和载体-载体都是失败的结果,这种结果的产生相对导致基因-载体的结果产生率下降.一般做重组载体选择
启动子,终止子,标记基因,如果还有空就写个复制位点
基因表达是基因经过转录、翻译,产生有生物活性的蛋白质的过程,是根据中心法则进行的.
抗性基因只作为标记基因,便于检测目的基因是否成功导入受体细胞,而不能促进目的基因的表达.
质粒是一个闭合的DNA圆圈,你得先切开它,把它切成一条线;然后你再从一长串DNA上切下你要的目的片段,用连接酶像胶水一样,吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了,但是这次这个DNA圆圈
目的基因一般是受体细胞不具有的,受体细胞基因缺陷的例外,运载体一般是环状DNA,具有标记基因,至少有两对启动子,切割点也不能少,受体细胞没有什么限制,动物细胞用显微注射技术,植物细胞采用农杆菌转化法,
很简单啊,受体中没有这个基因,也就没有相应的表型,如果有了,那就是基因进来了.比如,做基因工程用的大肠杆菌,没有氨苄青霉素抗性,而你的质粒上除了目的基因,还有氨苄青霉素抗性基因.如果转化后的大肠杆菌有
钙离子转化法啊.选修三的内容
导入时一回事,表达是另一回事你导入了不一定会表达,导入的目的是使目的基因在受体内表达出来.你必需构建好了载体(终止子,开始子,标记基因.等等),再植入到受体细胞中,从而表达出目的基因所控制的形状.
基因是遗传物质结构与功能的基本单位.只要基因结构保持完整,就能够表达.
翻译不出来.首先在转录水平上能转录出全场mRNA其次但是到翻译水平是,核糖体会沿着mRNA从3‘端向5’端滑动,遇到第一个atg开始翻译,此后遇到终止子停止翻译.因此你的蛋白很难被翻译出来.但是,终止
1.下列有关基因工程的叙述,不正确的是A.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达B.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性C.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类
构建之后,这三种情况都是存在的,然后先把这所有的全部导入细胞(当然不是同一个细胞),在质粒上会有某种抗性基因,就加入这种抗性基因(比如它抗某种抗生素,就加入这种抗生素,含目的基因—目的基因的这种重组片
可以,只要你的PCR扩增特异性够强,没有杂带.这其实就是理论和实际的差距,因为表达载体的扩增效率低,如果一次实验不成功,你还要从PCR步骤做起重新收集DNA,而如果克隆至扩增载体,每次只需扩增质粒回收
在体外构建基因表达载体主要是指将目的基因与载体(一般以质粒居多)连接,形成的重组DNA才能导入大肠杆菌,它能在大肠杆菌细胞内复制和表达.用Ca2+处理,我学的是用Ca2+处理大肠杆菌的细胞壁,增大细胞
要分析一下载体包含哪些表达调控原件.在哺乳动物表达系统里,用于筛选稳定细胞系的DHFR表达系统和GS表达系统是利用抗性基因来提高目的基因表达水平的.
构建基因表达载体也就是把目的基因和载体连接,其目的是通过载体把目的基因片段导入活细胞.
目的:表达目标基因,研究其功能与作用机制,包括蛋白质结构、功能等.组成:至少4部分:1.复制功能区,如质粒复制子、染色体同源重组区段、结合转移或其它类似功能区2外源基因克隆位点即多克隆位点3.筛选标记
有目的片段的引物就很简单,扩目的片段的PCR如果没有,扩质粒PCR,然后电泳比较前后质粒的片段大小