蛋白酶K在PCR产物中怎么加

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/01 20:59:26
蛋白酶K在PCR产物中怎么加
RT PCR为何都要跑电泳,在PCR的时候为何要加内参?是为了判断是否是PCR过程中出现问题?

有时候溶解曲线看上去是很特异的,而电泳却能跑出两条带;加内参是为了做表达比对,跟内参比,这样才能知道是高表达还是地表达,也可以作为判断PCR反应过程是否顺利的依据.

我loading buffer直接加到PCR产物中了,不知道影不影响PCR产物直接纯化

按理来说是不影响的,因为loadingbuffer里面主要是染料和比水重的成分,这样方便跑胶.你要是不放心的话就把产物都跑胶了,然后利用胶回收试剂盒来做.

实时PCR产物的Tm值为什么一般是在80以上?

PCR的退火温度是引物与模板之间的,而realtimePCR最后的退火温度是产物之间的

pcr中两条引物在两条链上吗?如果是,怎么控制产物的长度,谢谢!

是分别和两条链配对的序列.你可以在纸上画一下,第一次扩增时假设可以从引物向另一端无限延伸,那第二个循环时以一端是上游引物片段的序列为模板,从另一端的下游引物延伸过来,延伸到和上游引物第一个碱基处就终止

PCR中为什么要加引物

解题思路:在PCR技术中双链DNA分子中每条链都要和引物结合,进行复制。解题过程:解析:引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程。因为PCR中,DNA聚合酶不

我想在PCR产物上加一个酶切位点,请问正向引物和反向引物酶切位点系列一样吗?

酶切位点多数时候是反向回文结构,因此你看到的正向序列与反向互补序列是相同的,所以在两个方向的引物上看,酶切位点序列完全一样.

在反应硫化氢加二氧化硫生成硫加水中氧化产物还原产物是什么,它们的质量比是多少?

氧化产物和还原产物都是S,质量比为氧化产物:还原产物=2:1方程式是2H2S+SO2=3S+2H2O生成的3个S中,有2个是H2S中的S价态上升得到的,是氧化产物;剩下的1个是SO2中的S价态下降得到

在进行聚丙烯酰胺凝胶电泳以前,PCR产物需要变性吗?

恩,原始的方法是PCR产物与变性缓冲液混合,95或98度变性5到10分钟.变性缓冲液中含有甲酰胺,是一种变性剂.后来出现了核酸外切酶,PCR产物酶切成单链再跑,变性不变性效果可能一样的,不过酶有点贵.

MIX做的PCR产物在DGGE时要加Louding buffer吗?

不用加.如果自己混PCR的各种料,就要加.

刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问:

1一般不需要,你可以比对你用的高保真酶的buffer和Taq酶的buffer,要加也只能加差异的部分,如果直接加buffer里面离子浓度肯定都不对了;2都可以,不过我觉得还是应该在充分延伸后暂停或重新

蛋白酶是蛋白质,而蛋白酶又能分解蛋白质,那在加酶洗衣粉里,不会出现蛋白酶分解蛋白酶的情况吗?

蛋白酶都有专一性,只能作用一种或一类的蛋白质,加在洗衣粉里面的蛋白酶,是有严格的配方的,不能对里面已有的蛋白酶作用,而且还要很好的处理待洗衣服上的含蛋白质的污渍.希望能够帮到你.

在PCR产物基础上如何设计RACE引物,其原理是怎样的?

我也不是什么专家,只是做论文的时候研究过一段时间.我不太明白你的问题,不是cDNA,怎么能用RACE呢,RACE不是cDNA末端快速扩增技术(rapidamplificationofcDNAends,

在做DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中,对PCR产物进行变性时加的染液是什么呢?

对PCR产物进行变性时加的染液应该就是变性缓冲液吧,应该买试剂盒里面会有.在94度上放置5分钟后迅速放在冰上防止DNA复性就是了.再问:你好,还在吗,在94度进行变性5min,这个过程和PCR循环是没

植物生长为什么需要蛋白酶?蛋白酶在植物生长过程中起到什么作用?

因为植物也要进行蛋白质的新陈代谢!老的蛋白质,需要蛋白酶来降解,降解产物氨基酸可以被重新利用,用来合成新的蛋白质.

在PCR过程中加DMSO起到什么作用

DMSO可以提高PCR的特异性,帮助扩增一些难扩的模板.但要摸索,量大的话会抑制扩增,而且最好用于扩增1KB以上模板.

PCR产物引物二聚体严重,目的片段很淡,怎么解决啊?

引物重新设计.还有一个方法,就是回收目的条带,然后用回收后的产物为模板,再次扩增.

植物中,SSR的PCR扩曾产物,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析时,怎么判断共显性条带?

共显性:说白了就是可以分辨出纯合的跟杂合的这个有图示比较好理解.http://hi.baidu.com/%B6%E01%C9%E3%CA%CF%B6%C8%C8%C8%B0%AE/album/item

如何确保pcr产物以正确的方向克隆到表达载体中 (未翻译方向)

完全确保的话,第一,做酶切的两个酶要不一样;二你在做完酶切后,用磷酸化酶处理下,纯化后再连接(这一不会降低连接效率,但会确保质粒不自连.按正确方向克隆