诱导蛋白表达时菌的OD600值为0.9有什么影响
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/03 05:00:27
我也思考很久没能找出问题的根源
鱼源,这是由基因编码的氨基酸所决定的
一般都是在对数生长期进行诱导表达.OD值过高,细菌可能已经老化,诱导也表达量较少甚至不表达再问:谢谢,我又重新摇菌了,这下控制了OD值,还有个问题是不是,诱导后的要作对照没有诱导的菌株量多,我是摇了1
28度,200rpm培养16-20h就好了.如果抗生素没加错的话,你的应该没问题,可能是接种量少了点.
当然可以只要你包被的抗原可以与目的蛋白反应就行再用蛋白免疫一种实验动物得到抗体作为结合酶标二抗的底物这样就完成了一个夹心ELISA
可以可以可以可以可以再问:��Ŀ�����������������再答:�ҵ���ʦ����
种子你用LB就行了,2YT一般是用在表达优化上.另你的OD600是多少?
.谁说是OD260,当然是OD600了写实验方案的人自己弄错了吧……OD260是用来测游离状态DNA浓度的.
在没有诱导物的时候,基因不表达的原因之一是基因的上游与阻遏蛋白结合,使RNA聚合酶不能和启动子结合.而诱导物可以和基因的阻遏物结合,使阻遏物从基因上脱离,RNA聚合酶可以与启动子结合,启动转录,即基因
OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值.通过吸光值的定义可以知道,吸光值正比于溶液中的吸光物质的浓度.OD值越高说明发酵液中酵母菌的密度越大,测量细菌培养液在600nm出的吸光值,得到的O
用融合蛋白的tag做WesternBlotting,或者纯化后看融合蛋白的大小和预计的比较
优点:可以方便检测及分离纯化;缺点:可能影响到原蛋白的结构而破坏它天然的功能,或赋予其新的功能.具体的要看你和什么标签融合.
OD600称为浊度,波长在黄色范围.在600nm下,菌浓(干重)和吸光度有线性关系.当然若是形状不规则的如某些霉菌、放线菌,干重不能代表细胞数量,那么od600和菌浓(细胞浓度)也就没有正比关系了.o
只用sephadex分离效果很差的,特别是分子量差异比较小的时候,基本没有什么分离效果.可以先过离子交换柱:阴离子交换和阳离子交换,这样能除掉很多的蛋白,在过sephadex.
病毒是由蛋白质外壳以及内里的RNA或DNA组成的.当RNA或DNA的结构被破坏之后就失去了复制能力,亦即失活.但是蛋白质,不会被紫外线破坏,还是具有其应有的功能的.
第一个:HTM1没听说过.应该是him1p吧,胺酸甲基转移酶(Hmt1p)后面的Ndel,XhoI这两个是两种核酸内切酶,可以识别别切割特定序列的核酸.如果这两个最常用的工具酶都不知道的话,建议你别看
50ug/ml,之前做过的
是不是电泳上样量有问题啊?就是加过上样缓冲液后各个样品的体积不一样了