PCR的CT值有没有什么要求
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/17 21:52:49
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看看你的GAPDH引物Tm多少,有可能是因为PCR条件适合目的基因引物对而不适合内参引物对吗?再问:不知道,我是个新手什么都不懂再答:那么童鞋,你还是找一个师兄师姐前辈高人带一下。网上这样问很难问出来
引物的设计一般要考虑以下几个问题:1.长度,至少要16bp,通常为18-30bp2.解链温度(Tm值)3.避免引物内部或引物之间存在互补序列(3个碱基),从而减少引物二聚体的形成以及引物内部二级结构的
常规CT的基本结构 CT的主要结构包括两大部分:X线体层扫描装置和计算机系统.前者主要由产生X线束的发生器和球管,以及接收和检测X线的探测器组成;后者主要包括数据采集系统、中央处理系统、磁带机、操作
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致.如果加样量是一致的,而内参做出来差别大(比如3-4个CT值)那说明你的实验体系有严重的问题.理论上加入的DNA量一样多,内参的CT值应该都一样.如果你能肯定加样
阈值和基线的设置肯定会影响Ct值,你可以采用每次反应完后软件自己选定的阈值.你也可以手动调整,但是如果你是相同的模板,做不同反应,那你必须使两次实验的阈值和基线调到相同.使用相同的标准品,才能减小不同
参照以下real-timePCR引物设计原则:1.最好位于编码区5’端的300-400bp区域内,可以用DNAman,Alignment软件看看结果.2.产物不能形成二级结构(自由能小于58.61KJ
PT是电压互感器,是测量电压用的;CT是电流互感器,是测量电流用的.
高手们好.最近做酶切连接转化,最后做鉴定时,以菌落为模板进行PCR时可以见到有目的条带;当把菌落接种到LB液扩菌后,以菌液为模板进行PCR时却什么东东都没有?请问会是什么原因啊?多多指教啊!建议重新以
理论上是越一致越好.如果有很大的差异,说明实验有较大的误差,或者样本有降解.
通常情况下,我们认定为15到35CT比较合理,超过35个CT那么就算它没有扩增了,如果15之前起峰,那么就是模板浓度太高所引起的,如果发文章,那么建议你控制在15到35之间吧
仪器配套软件会直接给出来一个CT值,也可自己调节
各个学校和机构要求不一样.国家没有类似的要求.
请问你做RealTimePCR做几个循环的?40个吗?40个循环的话,CT值在30左右很正常的啊,CT值30的话大概是10000copies,说明模板含量低嘛,定量定量就是要CT值有大有小的才有比较嘛
加样误差,或者浓度本来就低再看下你设置的基线是否不对再问:都是先配好mix液,混匀后再分加至每个孔的,应该误差不会很大吧(出现Ct值的大多在20左右)再答:有没有看看扩增曲线是否正常?或者你的模板质量
△△Ct=△Ct(试验样品)—△Ct(基准样品)△Ct(试验样品)=Ct(试验样品,目的基因)—Ct(试验样品,内参基因)△Ct(基准样品)=Ct(基准样品,目的基因)—Ct(基准样品,内参基因)2-
不需要完全符合等差数列的.你说说看相关系数R2和扩增效率E的结果怎么样,之后再考虑调整体系和qPCR程序.
看了你空间里的溶解曲线,你可以看到溶解峰的温度都很低,全在80以下,你扩出来的东西多半只是引物,你跑定量的时候有做NTC的孔吗,如果有做,可以对照NTC组和加了模板的组,溶解峰还是一样的话,那你扩出来
1.肿瘤的早期诊断;2.良恶性肿瘤的鉴别诊断;3.恶性肿瘤分期和分级;4.寻找肿瘤原发病灶;5.治疗响应、疗效评估和预后诊断;6.引导肿瘤穿刺、活检和介入治疗;7.肿瘤放射治疗计划的制定;8.冠心病的
第一,螺旋CT和增强CT完全不是一回事.所谓螺旋CT,是指扫描的时候使用螺旋技术,而所谓增强CT,就是再扫描的同时或者扫描前半分钟左右从静脉里高压注射造影剂,用来观察病变部位的血供情况,来进一步判断病
△Ct(n)=Ct目的基因(n)-Ct内参基因(n);△△CT(n)=△Ct(n)-△Ct(1);然后算出2-△△CT;标准差我是同一处理做了3个平行算出来的.没法下标,用括号处理,