5端race实验PCR产物拖带

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：生物作业时间：2024/07/11 12:30:59

5端race实验PCR产物拖带
5端race实验PCR产物琼脂糖检测,电泳道有很明显的拖带,在曝光时间长的情况下隐隐约约能看到目的带,请问是什么原因啊?

你的条带有多大?越小的条带需要越高浓度的琼脂糖,若是小于500bp,建议你配2%以上甚至3%的琼脂糖凝胶.但这可能不是主要原因.
我也曾经有过这样的经历,我查出的原因是酶失活.不知道你的advantage酶保存的如何.
在做的过程中,最好按照说明书的要求,退火温度找好,一般引物Tm值最好是高于70度,这样能做Touch down PCR,条带清晰度会很好,很容易就能得到目的条带的.
以上仅为经验之谈,若有疑义,我们再讨论.:)

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