原代神经细胞培养用什么实验方法?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/06 20:55:48
原代神经细胞培养用什么实验方法?
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1.取出生后1-3天内的大鼠脑组织后,先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍的Hanks液中,脑组织比较柔软,反复吹打即可制成细胞悬液.2.为排除脂肪成分和其它碎块,把悬液注入离心管中,在室温直立5~10分钟后,细胞或细胞团块自然下沉,脂肪等杂物易漂浮于悬液表层,吸除上清,如此反复二三次可获得较多的细胞成分.3.向末次沉淀物中加入适量营养液,通过纱网或纱布滤过,计数细胞并调整好细胞密度,接种入培养瓶或皿中,置5%CO2温箱中培养.4.细胞生长汇合后,可用0.25%胰蛋白酶消化法做传代处理,加消化液的量以能覆盖细胞层即可,待细胞开始从瓶壁脱离(平均5~10分钟),加入含有血清培养液,吹打制成细胞悬液.生物帮上面有这方面的介绍,酶抑制剂 http://product.bio1000.com/100042/