从组织提取western用蛋白,组织剪碎时一定要在冰上进行吗(加裂解液之前)?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/07 15:43:41
从组织提取western用蛋白,组织剪碎时一定要在冰上进行吗(加裂解液之前)?
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根据我们实验室所用的实验手册,组织的粉碎使用的是臼和杵(非专业实验器具,市场买的陶瓷的),而且是加入液氮来降温,在液氮的浸泡中进行的.液氮蒸发极快,并不会跟裂解液混合.用冰块不能够很好的冷却.用剪刀剪也不能够很好的粉碎.
不过如果楼主需要的蛋白在所取组织中大量表达,该蛋白本身较为稳定,楼主所需的量又不多,在冰上剪碎也不是不行,应该也提取得到.理论上组织离体之后就不应该暴露在室温,对于蛋白质的保存温度越低越好,所以建议楼主从剪碎到裂解液之后全程都要使用冰块.
不过如果楼主需要的蛋白在所取组织中大量表达,该蛋白本身较为稳定,楼主所需的量又不多,在冰上剪碎也不是不行,应该也提取得到.理论上组织离体之后就不应该暴露在室温,对于蛋白质的保存温度越低越好,所以建议楼主从剪碎到裂解液之后全程都要使用冰块.