制备感受态的大肠杆菌只是一个空壳?里面没有质粒那些?是这样吗?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/11 23:15:10
制备感受态的大肠杆菌只是一个空壳?里面没有质粒那些?是这样吗?
问一个同学,同学这样回答的,想请教一下高手哈,我自己只是感觉很奇怪
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不是这样的.感受态是指大肠杆菌的细胞膜处于容易吸收外源DNA的状态.大肠杆菌本身的遗传物质DNA还在细胞中,不能是一个空壳.否则,大肠杆菌自身将因为缺乏自己的遗传物质无法繁殖而死亡.后来吸收的重组质粒带有目的基因,但是缺乏大肠杆菌生长繁殖所必须的基因.如果大肠杆菌自己的DNA丢失,就无法分裂繁殖,人工导入的质粒DNA也不会得到表达,就失去了意义.总之,大肠杆菌自身的DNA必须要存在.
再问: 恩恩,谢谢哈,在问一下哈,那它本身自己也有质粒哟,导入一个质粒,就有两个类型。我们做实验,酶切,连接,导入,最后做蓝白筛选,结果没长菌,培养板中加了氨苄。老师说肯定是感受态的制备出了问题,他还说如果长了菌,就是感受态没问题,没长菌,感受态就没问题。是不是这样的呀?我想得是感受态细胞中没有质粒DNA哈,只有基因组DNA..这样哈。是不是呢?谢谢咯哟
再答: 你的哈哟真多哟,呵呵。。。我刚刚下线了,不好意思。。。 嗯,是这样的。大肠杆菌本身的基因组DNA不具备氨苄青霉素抗性,而我们导入的质粒上有氨苄青霉素抗性基因。所以只有成功导入质粒的大肠杆菌才能在氨苄平板上生长。如果没长菌,说明感受提制备存在问题或者质粒导入过程失败(质粒没有成功导入)。
再问: 呵呵,太感谢了,就是这个问题让我困惑了一下,做感受态的大肠杆菌应该有质粒哈?只是质粒上不含氨苄抗性基因。。
再答: 嗯,对的。是这样的。不客气。
再问: 恩恩,谢谢哈,在问一下哈,那它本身自己也有质粒哟,导入一个质粒,就有两个类型。我们做实验,酶切,连接,导入,最后做蓝白筛选,结果没长菌,培养板中加了氨苄。老师说肯定是感受态的制备出了问题,他还说如果长了菌,就是感受态没问题,没长菌,感受态就没问题。是不是这样的呀?我想得是感受态细胞中没有质粒DNA哈,只有基因组DNA..这样哈。是不是呢?谢谢咯哟
再答: 你的哈哟真多哟,呵呵。。。我刚刚下线了,不好意思。。。 嗯,是这样的。大肠杆菌本身的基因组DNA不具备氨苄青霉素抗性,而我们导入的质粒上有氨苄青霉素抗性基因。所以只有成功导入质粒的大肠杆菌才能在氨苄平板上生长。如果没长菌,说明感受提制备存在问题或者质粒导入过程失败(质粒没有成功导入)。
再问: 呵呵,太感谢了,就是这个问题让我困惑了一下,做感受态的大肠杆菌应该有质粒哈?只是质粒上不含氨苄抗性基因。。
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