PCR老P不出来是什么原因,解决办法是什么?

来源：学生作业帮编辑：搜搜考试网作业帮分类：语文作业时间：2024/08/03 09:02:37

PCR老P不出来是什么原因,解决办法是什么?
我是用手提和试剂盒都提DNA,但是全都P不出来,引物用的是799f-1492r,肯定的没问题的,然后PCR时加了BSA,不但样品P出来了,阴性对照也有目的条带,而且很明显.

799f-1492r是16SrDNA基因通用引物吧.
阴性对照能p出来,及有可能是PCR污染了,实验室的细菌很多,能用799f-1492r引物p出来很正常,你重复阴性实验,看所有试剂是否被污染（水、buffer、酶都可能污染,甚至是引物稀释液）.后边还要用,污染的话就掉大了.
没污染,建议你再重复试验,设阴性对照的同时设阳性对照（用细菌做模板）,如果阳性p出,阴性没p出,就说明你的实验本身和引物是没问题的（不要太轻易相信引物公司,谁知道引物是不是错了或缺了）.再看你的实验组能否p出来,如果你对自己提的模板有足够信心,那就说明是阴性结果（可能性不大,据说799f-1492r至少能p出线粒体16srDNA基因吧）,如果你对所提模板没有100%信心,我觉得,你还是要再检查下模板提取过程.
不知你是否是针对内生菌还是线粒体,你的DNA提取过程是否会损伤或去除这些DNA?

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