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如何扩增序列未知的基因片段

来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/29 03:38:04
如何扩增序列未知的基因片段
如何扩增序列未知的基因片段
首先你要知道自己要扩增的基因片段的保守序列,根据保守序列设计简并引物,扩增保守序列之间的序列,然后再进行3’和5’RACE,扩增保守序列两端的序列,合起来就是要扩增的序列了!具体操作可参考相关文献.
再问: 你好,非常感谢。可是该基因的序列查不到,只知道跟它连锁的几个标记的序列,但是也相距差不多1cM了。 The primer sequences were 5′-GGI GGIGTI GGI AAI ACI AC-3′ (forward) and 5′-ARI GCT ARI GGIARI CC-3′ (reverse) (R, representing a mixture of bases A and G;I, inosine).还有,这段文字里德引物序列是怎么回事呀?以前没有接触过这种的。
再答: 该基因序列查不到,可以查相近物种的该基因序列啊!或者可不可以利用和它连锁的标记序列设计引物,扩增包括该基因的片段!这是一对简并引物,你后面英文都写了R代表A和G的混合碱基,I是次黄嘌呤核苷。以前接触的是针对已知序列的特异性引物,和简并引物不一样的,你可以上网上查阅相关资料了解一下!
再问: 呵呵,谢谢,我也是想利用标记序列设计引物,可是这个基因只有两三千bp,而如果要利用和它连锁的标记序列设计引物,扩增包括该基因的片段的话,就是45kb .唉,纠结啊,呵呵。