我的试验是要做一个基因多个位点的多态性,先提取基因组DNA,然后PCR扩增目的片段,之后酶切
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/12 13:40:16
我的试验是要做一个基因多个位点的多态性,先提取基因组DNA,然后PCR扩增目的片段,之后酶切
酶切位点是哪里,怎么选择?我真的是新手,
酶切位点是哪里,怎么选择?我真的是新手,
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目前一般的方法是直接测序了
如果酶切,若是你知道多态位点的序列,可以根据这个序列选择内切酶;如果不知道,那就多尝试一下识别位点是4个bp的那几个常用的内切酶吧
再问: 是不是应该找切开多态位点附近的位点的酶啊?我试过dnaman ,没有找到啊
再答: 就是找应该切开多态位点的酶。 譬如,一段序列含有……GAATTC……,它能被EcoRI切开;而如果这个酶切位点恰好是多态位点,譬如GAATCC,那么EcoRI就切不开了,所以根据EcoRI后电泳条带可以判定基因多态性 所以,如果你能知道多态位点的序列,那么就可以有针对性地选择内切酶;如果你不知道,那么就得通过实验来尝试
再问: 我是在NCBI上输入rs序列号,然后就有包括多态位点的序列,用DNAMAN查过,没有多态位点附近的限制酶,怎么办?
再答: 没有合适的酶不大可能,你换一下另一种或几种多态序列看看 以上面的为例,你输入的是……GAATCC……没找到合适的酶,但如果输入的是……GAATTC……,那就能知道了 万一真的没有合适的内切酶,那就只能放弃这种方法了,但可以用其它方式,譬如你设计一个引物,它的3‘端最后一个碱基就是多态位点,这样,与这个引物严格匹配的能扩增,如果多态位点有变异,那么就扩增不出来
再问: 找到了三个位点的酶,另外有一个酶还没有商业化(北京NEC说的),其他两个位点找不到酶了,我用探针是不是可以啊
如果酶切,若是你知道多态位点的序列,可以根据这个序列选择内切酶;如果不知道,那就多尝试一下识别位点是4个bp的那几个常用的内切酶吧
再问: 是不是应该找切开多态位点附近的位点的酶啊?我试过dnaman ,没有找到啊
再答: 就是找应该切开多态位点的酶。 譬如,一段序列含有……GAATTC……,它能被EcoRI切开;而如果这个酶切位点恰好是多态位点,譬如GAATCC,那么EcoRI就切不开了,所以根据EcoRI后电泳条带可以判定基因多态性 所以,如果你能知道多态位点的序列,那么就可以有针对性地选择内切酶;如果你不知道,那么就得通过实验来尝试
再问: 我是在NCBI上输入rs序列号,然后就有包括多态位点的序列,用DNAMAN查过,没有多态位点附近的限制酶,怎么办?
再答: 没有合适的酶不大可能,你换一下另一种或几种多态序列看看 以上面的为例,你输入的是……GAATCC……没找到合适的酶,但如果输入的是……GAATTC……,那就能知道了 万一真的没有合适的内切酶,那就只能放弃这种方法了,但可以用其它方式,譬如你设计一个引物,它的3‘端最后一个碱基就是多态位点,这样,与这个引物严格匹配的能扩增,如果多态位点有变异,那么就扩增不出来
再问: 找到了三个位点的酶,另外有一个酶还没有商业化(北京NEC说的),其他两个位点找不到酶了,我用探针是不是可以啊
我的试验是要做一个基因多个位点的多态性,先提取基因组DNA,然后PCR扩增目的片段,之后酶切
对PCR扩增后的目的基因如何进行提取
PCR扩增出目的片段之后为什么要酶切?酶切下来的是目的片段和载体?然后再把它们连起来?很困惑.
大家好,问一个不能等到台面上的问题:目的基因片段是扩增片段吗?什么是RT-PCR的目的基因片段,谢谢
PCR扩增后的目的基因如何提取分离?对阳性克隆中的目的基因又如何提取分离?
从基因文库中提取的DNA要不要再用PCR扩增了
PCR引物设计问题如果我设计的引物,扩增出来的目的片段长度为200BP,但是石蜡包埋组织提取出来的DNA模板大多数在10
pcr扩增目的片段时,在第几个循环后才能出现目的片段长度的双链DNA分子?
菌落pcr是否可以直接扩增基因组上的目的基因?单菌落需要特殊处理吗
利用PCR技术扩增含目的基因的DNA分子来形成目的基因,需要3步.为什么?
PCR为什么能扩增特意的基因片段呢
PCR扩增技术获取目的基因的原理是?