我想麻烦问下,我想看一微升质粒有多少微克DNA,用电泳跑完了,不知道应该怎么估算,
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/01 18:20:43
我想麻烦问下,我想看一微升质粒有多少微克DNA,用电泳跑完了,不知道应该怎么估算,
我的marker是含有1*loading buffer,标准使用量6ul,其中4000bp条带约为100ng/5ul,其余条带浓度约为50ng/ul
参照片段:1000bp,2000bp,3000bp,4000bp,5000bp,6000bp,8000bp,10000bp
如果想要估算我的质粒的浓度的话,我按照这个marker,我应该怎么加样,怎么估算呢?
我的marker是含有1*loading buffer,标准使用量6ul,其中4000bp条带约为100ng/5ul,其余条带浓度约为50ng/ul
参照片段:1000bp,2000bp,3000bp,4000bp,5000bp,6000bp,8000bp,10000bp
如果想要估算我的质粒的浓度的话,我按照这个marker,我应该怎么加样,怎么估算呢?
点5ulMARKer(其实最好用超螺旋Marker),1ul 质粒(松弛型,如果是严谨性质粒浓度比较低要多点几ul).电泳后比较条带亮度,如果和4kb条带一样亮则为100ng/ul,如果和其他条带一样亮为50ng/ul
再问: 点1ul的质粒,那点多少buffer有关系吗?还是也要确定量?100ng/ul的话,不就等于0.1ug/ul,是不是含量比较低的?我想测序,但是测序的公司说,要提供5ug的质粒……
再答: buffer 没有很大关系。0.1ug/ul的质粒还可以啦,给测序公司10ul左右就可以了,
再问: 点1ul的质粒,那点多少buffer有关系吗?还是也要确定量?100ng/ul的话,不就等于0.1ug/ul,是不是含量比较低的?我想测序,但是测序的公司说,要提供5ug的质粒……
再答: buffer 没有很大关系。0.1ug/ul的质粒还可以啦,给测序公司10ul左右就可以了,
我想麻烦问下,我想看一微升质粒有多少微克DNA,用电泳跑完了,不知道应该怎么估算,
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