MTT比色法细胞活力检测实验中有哪些注意事项?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/03 09:15:10
MTT比色法细胞活力检测实验中有哪些注意事项?
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博凌科为(1)选择适当的细胞接种浓度.一般情况下,96孔培养板的内贴壁细胞长满时约有lo6个细胞.但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT比色法细胞活力检测实验前,掌握每一种细胞的贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定实验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满.这样,才能保证形成酌量的MTT结晶,与细胞数量呈线性关系.(2)避免血清干扰.用含15%胎牛血清培养液培养细胞时,高浓度的血清物质会影响实验孔的光吸收值.由于实验本底增加,会使实验敏感.因此,一般选择浓度小于10%胎牛血清的培养液进行.在呈色后,尽量吸净培养孔内残余培养液.3)设空白对照.与实验孔平行设不加细胞只加培养液的空白孔.其它实验步骤保持一致.最后比色时,以空白孔调零.