设计一个实验来证明,已经从线粒体中纯化出了一种蛋白复合体,并认为你纯化得到的就是ATP合酶你的设想
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/02 19:00:14
设计一个实验来证明,已经从线粒体中纯化出了一种蛋白复合体,并认为你纯化得到的就是ATP合酶你的设想
请综合利用生物膜、跨膜离子的运输及生物体内能量产生等知识
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方法一:首先将你纯化的蛋白进行SDS-PAGE,确定得到已经纯化的蛋白的大小.如果大小与ATP合酶蛋白的标准值相近,将蛋白样品进行质谱和N端测序分析.这样得到的结果是很准确的.
方法二:设计你已经纯化出的ATP合酶的用特异性抗体,用western blot进行检测.如果你纯化的蛋白有tag的话,也可以直接用抗tag的抗体.
方法二:可以构建脂质体(liposome).将你已经纯化的蛋白插入脂质体中,脂质体外含有ADP,通过测量脂质体内部的ATP生成来确定纯化的ATP合酶是否具有功能.
方法二:设计你已经纯化出的ATP合酶的用特异性抗体,用western blot进行检测.如果你纯化的蛋白有tag的话,也可以直接用抗tag的抗体.
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