做Elisa试验时,OD值偏低时什么原因啊!
来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/19 17:11:17
做Elisa试验时,OD值偏低时什么原因啊!
是自己用抗体的ELISA,不管是样品还是标准样品都偏低,是过氧化氢酶,数据都在0.6以下.
那加样有什么注意的事项吗?模板浓度一般在什么范围呢?
是自己用抗体的ELISA,不管是样品还是标准样品都偏低,是过氧化氢酶,数据都在0.6以下.
那加样有什么注意的事项吗?模板浓度一般在什么范围呢?
你最好再详细点,可能的原因
1.标准系列的问题.看标准的浓度有没有提高的潜力.这要看目前你的标准的拟合曲线.
2.显色试剂的问题.TMB显色试剂过期或污染等.
3.酶标抗体的问题.酶标抗体过期、储存条件不当,稀释液不含蛋白质、基质中有影响酶活的物质如某些防腐剂等.
4 样品和标准基质影响.不知你的方法中标准和样品是否是同样的基质?基质中如果有大浓度的蛋白或其他影响抗体抗原结合的物质.
5.孵育条件 实验中孵育的条件是不是控制的?室温的话会受环境温度影响.一般都是37度湿盒.
6.洗涤的问题.每次洗板洗几次?每次多长时间?什么方式?次数过多、时间过长、洗版过猛都会造成显色偏低.
1.标准系列的问题.看标准的浓度有没有提高的潜力.这要看目前你的标准的拟合曲线.
2.显色试剂的问题.TMB显色试剂过期或污染等.
3.酶标抗体的问题.酶标抗体过期、储存条件不当,稀释液不含蛋白质、基质中有影响酶活的物质如某些防腐剂等.
4 样品和标准基质影响.不知你的方法中标准和样品是否是同样的基质?基质中如果有大浓度的蛋白或其他影响抗体抗原结合的物质.
5.孵育条件 实验中孵育的条件是不是控制的?室温的话会受环境温度影响.一般都是37度湿盒.
6.洗涤的问题.每次洗板洗几次?每次多长时间?什么方式?次数过多、时间过长、洗版过猛都会造成显色偏低.
做Elisa试验时,OD值偏低时什么原因啊!
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