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我是用cDNA作模板的,退火53°第一次跑出来了,目的在150左右,又粗又亮,然后纯化就纯没了,于是再重复P,每一次P的

来源:学生作业帮 编辑:搜搜考试网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/19 12:36:08
我是用cDNA作模板的,退火53°第一次跑出来了,目的在150左右,又粗又亮,然后纯化就纯没了,于是再重复P,每一次P的结果都不一样,目的条带时有时无,杂带也是时有时无,有的时候杂带很多,有的时候P出来什么都没有,请问是什么原因,还有就是,我做的这个,文献中其他物种的退火温度是60,我该怎么办……
我是用cDNA作模板的,退火53°第一次跑出来了,目的在150左右,又粗又亮,然后纯化就纯没了,于是再重复P,每一次P的
镁离子浓度,引物都正确吧,酶呢?带纹和镁离子浓度有很大关系,查看下原来的实验记录哦.
你说的纯化没有了?是没有切对带吧?考虑150是你的Cdna的值吗?有点小吧,一般在300差点吧?