搜搜考试网载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?
来源：学生作业帮 编辑：搜搜考试网作业帮 分类：语文作业 时间：2024/07/05 04:36:24
载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?
将载体与插入片段连接上之后,进入到宿主细胞转化：A：200ul感受态细胞加入连接产物后 轻轻混匀 冰上放置30分钟 42度水浴90秒 冰浴2分钟 加入200ulLB液体培养基 37度摇床30分钟 然后涂板 4度冰箱 在往后是质粒DNA的转化 就是把连接产物换成了PUc19质粒了,其他步骤都一样 请问这是为什么呢?
那感受态细胞加入连接产物培养出的菌落跟感受态加入质粒培养出来的菌落，用哪个呀？ 我的意思是筛选出重组子克隆是要从感受态细胞加入连接产物培养出的菌落选呢？还是感受态加入质粒培养出来的菌落里选呢？要是两个里面都有选哪个比较好，选出来了之后要质粒小量提取了吗？要从上面两个菌里哪个里提取呢？？重点就是感受态细胞加入连接产物培养出的菌落跟感受态加入质粒培养出来的菌落哪个是质粒小提要提取的呢？？求助高人们了指点一下我这个菜鸟吧
将载体与插入片段连接上之后,进入到宿主细胞转化：A：200ul感受态细胞加入连接产物后 轻轻混匀 冰上放置30分钟 42度水浴90秒 冰浴2分钟 加入200ulLB液体培养基 37度摇床30分钟 然后涂板 4度冰箱 在往后是质粒DNA的转化 就是把连接产物换成了PUc19质粒了,其他步骤都一样 请问这是为什么呢?
那感受态细胞加入连接产物培养出的菌落跟感受态加入质粒培养出来的菌落，用哪个呀？ 我的意思是筛选出重组子克隆是要从感受态细胞加入连接产物培养出的菌落选呢？还是感受态加入质粒培养出来的菌落里选呢？要是两个里面都有选哪个比较好，选出来了之后要质粒小量提取了吗？要从上面两个菌里哪个里提取呢？？重点就是感受态细胞加入连接产物培养出的菌落跟感受态加入质粒培养出来的菌落哪个是质粒小提要提取的呢？？求助高人们了指点一下我这个菜鸟吧
PUC19是个正control,就是一定会出clone的,如果没有,就是操作步骤有问题
看你的protocol就是重复做一遍
这样的话还不如一起做
涂板以后直接放37度啊
补充：根据你的说法,从“连接产物”里面选,PUC19是正control了,你挑克隆只会挑到跟原来一样的,没有用的
ps：“连接产物”那也是个质粒
看你的protocol就是重复做一遍
这样的话还不如一起做
涂板以后直接放37度啊
补充：根据你的说法,从“连接产物”里面选,PUC19是正control了,你挑克隆只会挑到跟原来一样的,没有用的
ps：“连接产物”那也是个质粒
载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?
如果将PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接,并转化入宿主大肠杆菌中,写出技术路线（包括基因和载体的连接、转化和鉴定）和关
为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急
农杆菌转化法移动目的基因进入受体细胞后 目的基因插入的位置是?
转化
构建载体的时候,先用设计好的引物PCR所要的目的基因,再和T载体连接,再转化,再小抽,再双酶切,再和
如果希望在哺乳动物细胞中表达X基因,表达载体的选择标准是什么?如何将表达的重组体转化入宿主细胞?如何检测是否转化?
为什么要转化学困生?
您好,我想问问在细胞转化时,pUC19载体为何选用DH5a菌株,为什么不选择TOP10或JM109呢?是因为价钱关系吗
农杆菌转化法转移目的基因进入受体细胞后
用电穿孔法转化毕赤酵母,是用线性化的质粒,那么转化后,线性质粒进入细胞后是以环状还是线性的状态存在.
目的基因通过载体进入到受体细胞后,和载体一起复制共存,还是插入到细胞内的DNA上了?